Solutions de microscopie miniature
La microscopie miniature à fluorescence utilise un microscope à tête légère et à faible encombrement pour enregistrer l'activité calcique des cellules marquées par des fluorophores et cartographier leurs positions spatiales au sein d'un réseau neuronal chez des animaux de laboratoire qui se comportent. Il peut également être associé à l'optogénétique pour contrôler les cellules marquées à l'opsine.
- Avantages
- Enregistrer l'activité des cellules individuelles dans une population spécifique de cellules neuronales ou gliales à l'aide de capteurs génétiquement codés
- Localiser la position spatiale d'un groupe de cellules
- Corréler l'activité cellulaire fonctionnelle et morphologique avec le comportement animal
- Surveiller la même population de cellules pendant quelques mois
- Moduler l'activité dans une population spécifique en combinant l'imagerie avec des manipulations optogénétiques utilisant des opsines génétiquement codées
- Comparez l'activité de deux populations ou tirez parti des approches de marquage génétique combinatoire lors de l'utilisation de microscopes à fluorescence bicolores
- Combinez l'imagerie au microscope avec d'autres modalités telles que l'injection de fluide ou la photométrie sur fibre à l'aide d'implants spécialisés.
- Inconvénients
- Systèmes d'enregistrement plus lourds que la photométrie, puisque le microscope miniaturisé est attaché à l'animal pendant l'enregistrement
- Profondeur d'échantillonnage limitée, en raison de la diffusion et de l'absorption de la lumière (imagerie par épifluorescence à 1 photon)
- Implant chronique invasif
Solutions
Doric propose des solutions complètes, clés en main, qui incluent tous les composants nécessaires à l'imagerie par fluorescence chez les animaux au comportement libre, à partir de l'implant jusqu'à l'interface du logiciel.
Pour l'imagerie à marqueur unique du cerveau profond, optez pour les systèmes de Microscopie « Twist-on efocus » disponible pour l'imagerie par fluorescence verte ou rouge. Ce type de système bénéficie de :
- Une connexion intuitive et robuste entre le corps du microscope et la canule d'imagerie grâce au nouveau mécanisme « Twist-on » (Il n'y a aucune pression appliqué sur le crâne lors de la connexion, donc aucun outil n'est requis) ;
- Un réglage électronique précis de la mise au point qui permet de suivre les mêmes cellules au fil du temps et améliore le signal de fluorescence et la résolution spatiale ;
- L'auto-alignement de la canule d'imagerie: la lentille relais GRIN est toujours parfaitement alignée avec le microscope ;
- Un implant de lentille GRIN pour chaque application: lentilles GRIN de 1 mm de diamètre pour un champ de vision plus large lors de l'imagerie de régions cérébrales superficielles (cortex, hippocampe), ou lentilles GRIN de 0.5 mm de diamètre moins invasives pour imager des structures plus profondes (hypothalamus). De plus, une pointe de prisme est offerte en option pour une imagerie latérale moins invasive ;
- Une option de stimulation optogénétique fournissant jusqu'à 55 mW / mm2 de lumière jaune (pulsée ou continue) à l'extrémité de l'implant ;
- Durabilité améliorée avec des câbles à connecteurs et un corps de microscope en aluminium conçu de manière légèrte.
Pour enregistrer simultanément l'activité de deux populations marquées avec deux fluorophores spectralement distincts, le systèmes de Microscopie à Fluorescence 2 couleurs devrait être considéré. Les microscopes bicolores Doric sont hautement miniaturisés et intègrent deux capteurs d'image indépendants optimisés pour l'imagerie par fluorescence GCaMP rouge.
Si vous êtes plus intéressé par les couches superficielles du cerveau, envisagez des modèles de surface incluant une seule couleur or Microscopes à 2 couleurs. Sans la nécessité d'utilisation besoin des implants à tige (par exemple, les lentilles GRIN), la microscopie de surface est moins invasive que les microscopes pour cerveau profond, puisqu'elle offre un champ de vision plus large. Les microscopes de surface peuvent également être combinés avec un prisme en verre pour visionner des structures cérébrales jusqu'à 1.5 mm de profondeur.
| Tableau de comparaison des systèmes de microscopie miniature à lentilles Doric | ||||
| Type de système | Cerveau profond 1-couleur |
Surface 1-couleur |
Cerveau profond 2-couleur |
Surface 2-couleur |
| Mise au point électronique | Oui | Non | Non | Non |
| Option optogénétique | Oui | Oui | Non | Non |
| Option d'injection de fluide | Bientôt disponible | Oui | Oui | Oui |
| Option de joint rotatif | Oui | Oui | Oui | Oui |
Références externes
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